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您的位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > 細胞分類 > 細胞系 > LS174T細胞LS174T 人結直腸腺癌細胞/STR鑒定

產(chǎn)品中心
產(chǎn)品名稱:

LS174T 人結直腸腺癌細胞/STR鑒定

產(chǎn)品型號: LS174T細胞
產(chǎn)品時間: 2025-11-14
描述:LS174T 人結直腸腺癌細胞/STR鑒定
細胞介紹
該細胞是LS180結腸腺癌細胞株的yi蛋白酶化變種。它比親本更易傳代,像LS180一樣生成大量的癌胚抗原(CEA)。電鏡研究表明,它有豐富的微絲和胞漿黏液素液泡;血清學檢測直腸抗原3陽性;p53抗原表達陰性。

產(chǎn)品介紹

LS174T 人結直腸腺癌細胞/STR鑒定/鏡像綺點(iCell)介紹

細胞介紹

該細胞是LS180結腸腺癌細胞株的yi蛋白酶化變種。它比親本更易傳代,像LS180一樣生成大量的癌胚抗原(CEA)。電鏡研究表明,它有豐富的微絲和胞漿黏液素液泡;血清學檢測直腸抗原3陽性;p53抗原表達陰性,但mRNA表達陽性;角蛋白陽性;癌基因c-myc、N-myc、H-ras、N-ras、Myb和fos的表達呈陽性;癌基因k-ras和sis的表達未做檢測;可產(chǎn)生IL-10、IL-6和黏蛋白。


細胞特性

1) 來源:人結直腸

2) 形態(tài):上皮樣,貼璧生長

3) 含量:>1x106 個/mL

4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝


運輸和保存

可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式:

(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇;

(2)存活細胞,收到后應繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。

(3)收到細胞后請拍照,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時拍照與我們聯(lián)系。


細胞用途:僅供科研使用。

LS174T 人結直腸腺癌細胞/STR鑒定/鏡像綺點(iCell)接受后的處理:

1) 收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。

2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。

3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml新的*培養(yǎng)基。

4) 如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代。

5) 接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。


細胞培養(yǎng)步驟

細胞培養(yǎng)步驟

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1) 準備MEM培養(yǎng)基;優(yōu)質胎牛血清,10%;雙抗,1%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二. 細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 收到細胞后*傳代推薦將細胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2到1:5的比例進行。

細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。

下面T25瓶為例;

1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1mlyi酶,細胞變圓脫落后,加入2ml*培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。

3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司主要產(chǎn)品和技術服務:

一、原代細胞服務
      各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源;
      多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源;
      原代細胞分離和培養(yǎng)相關試劑、kit、培養(yǎng)基添加劑等;
      原代細胞相關技術服務和整體實驗外包服務;

二、細胞株/系服務
      細胞株/系培養(yǎng)、增殖、凍存和相關說明書;
      細胞系培養(yǎng)過程的技術指導;
      細胞系培養(yǎng)基、添加劑、血清及相關生長因子、試劑等;

三、iPS細胞
      iPS細胞基礎培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層在);
      iPS細胞增殖及冷凍保存;
      iPS基礎培養(yǎng)技術實習;
      新藥及實驗儀器上市前評估;

四、技術外包服務:各類細胞生物學實驗、分子生物學實驗、顯微鏡拍照服務等

五、其他:根據(jù)客戶需要定制服務等



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